wymaganiaH bmp

250 -

miareczkowanie. W przypadku Innych enzymów stężenia\początkowego E_q ozęsto nie znamy* Wtedy stosuje się wzoreowe substra- . ty i wyznacza się względną wartośó stałej kj^.

1/CS3o >wc<

Rya.3ć. Wykres Lineweara-Burka

Do tej pory zajmowaliśmy się prostymi reakojami enzymatycznymi. Większość reakcji enzymatyoznyoh jest jednak bardziej¹ złożona. W przypadku procesów metabolieanyoh na przykład,do u-tworzonego w etapie pierwszym związku BS.w drugim etapie przyłącza się koenzym lub drogi substrat. Reakcje enzymatyozne z reguły są reakcjami wieloetapowymi. Równanie /II.143/ jest jednak spełnione także dla tych złożonyoh reakcji enzymatycznych. Dla wieloetapowych reakoji współczynniki kj^ i są funkcja-ol stałych szybkości reakoji kliku etapów. Równanie stechi.0-metryozne złożonej reakcji najozęśoiej zapisuj# się następują-.

oot

B + S

-> ES' -» B + P,

/XI.149/

+P-1

Stosująo tan modal kinetyczny modna opisać kinetykę reakcji hydrolizy białek wobec ohymotrypayny oraz hydrolizy prostych pochodnyeh kwasów karboksylowych, takich jak astry lub amidy. Zgodnie a równaniom /II.149/ substrat najpierw łąozy się z enzymem i powstaje związek pośredni ES. W etapie drugim,w wyniku: wemnątrsosąsteozkowego przegrupowania powstaje acylowy związek przejśolowy p^. Drugi związek przejściowy ES' / ecyl--enzym / jest nowym estrem, w którym reszta kwasu karboksylowego pierwszego estru przereagowala z grupą funkcyjną aery-ny występującej w oząsteozoe enzymu. Schemat reakoji przedstawiono na rysunku 37.

HOCHC^

Rys.37. Sohemat kinetyczny reakoji enzymatyoznej