3

2.6.1. JAŁOWOŚĆ

FARMAKOPEA POLSKA WYD. VII TOM I

obojętny roztwór peptonu mięsnego lub kazeinowego (1 g/1) i badać w sposób podany dla roztworów wodnych stosując sączki odpowiednie do wybranego rozpuszczalnika.

Oleje i roztwory olejowe. Na każde z podłoży użyć produkt w ilości nie mniejszej niż podano w tabeli 2.6.1.-2. Oleje i roztwory olejowe o wystarczająco niskiej lepkości można sączyć bez rozcieńczania stosując suche sączki. Oleje lepkie, jeżeli to konieczne, można rozcieńczyć odpowiednim jałowym rozpuszczalnikiem, jak mirystynian izopropylu, dla którego w warunkach badania brak właściwości przeciwdrobnoustro-jowych. Pozostawić olej do przeniknięcia przez sączek pod ciężarem własnym, a następnie sączyć stopniowo stosując nadciśnienie lub podciśnienie. Przemyć sączek co najmniej 3-krotnie, sącząc porcje po 100 ml odpowiedniego jałowego rozcieńczalnika, jak np. obojętny roztwór peptonu mięsnego lub kazeinowego (1 g/1) z dodatkiem odpowiedniego emulgatora w stężeniu dobranym w badaniu walidacyjnym, np. po-lisorbatu 80 (10 g/1). Przenieść sączek lub sączki do podłoża hodowlanego lub odwrotnie, jak podano powyżej dla roztworów wodnych i inkubować stosując taką samą temperaturę i czas inkubacji.

Maści i kremy. Na każde z podłoży użyć produkt w ilości nie mniejszej niż podano w tabeli 2.6.1.-2. Maści na podłożu tłuszczowym i emulsje typu woda-olej można rozcieńczać do stężenia 1% w mirystynianie izopropylu jak podano powyżej, z ogrzewaniem do temperatury nie wyższej niż 40°C, jeżeli to konieczne. W wyjątkowych przypadkach może zachodzić konieczność ogrzania do temperatury nie wyższej niż 44°C. Sączyć w jak najkrótszym czasie i postępować jak podano powyżej dla olejów i roztworów olejowych.

Metoda bezpośredniego posiewu. Do podłoża hodowlanego wprowadzić bezpośrednio produkt badany w ilości podanej w tabeli 2.6.1 .-2 tak, aby objętość produktu stanowiła nie więcej niż 10% objętości podłoża, jeżeli nie podano inaczej.

Jeżeli produkt badany posiada właściwości przeciwdrob-noustrojowe, wykonać badanie po zneutralizowaniu produktu odpowiednią substancją neutralizującą lub po rozcieńczeniu w wystarczająco dużej objętości podłoża. Jeżeli jest konieczne użycie do badania dużej objętości produktu, rozważyć zastosowanie stężonego podłoża przygotowanego z uwzględnieniem wykonywanych później rozcieńczeń. Tam gdzie jest to wskazane, można dodać stężonego podłoża bezpośrednio do pojemnika z produktem.

Płyny olejowe. Stosować podłoża z dodatkiem odpowiedniego emulgatora w stężeniu uznanym za właściwe w badaniu walidacyjnym, np. polisorbat 80 (10 g/1).

Maści i kremy. Rozcieńczyć produkt 1:10 emulgując w roztworze wybranego emulgatora w jałowym rozcieńczalniku takim jak obojętny roztwór peptonu mięsnego lub kazeinowego (1 g/1). Przenieść rozcieńczony produkt do podłoża niezawie-rającego emulgatora.

Inkubować posiane podłoża przez okres nie krótszy niż 14 dni. Obserwować hodowle kilkakrotnie w okresie inkubacji. Podłoża w pojemnikach zawierających produkty olejowe codziennie łagodnie wstrząsać. Gdy jednak stosowane jest podłoże płynne tioglikolanowe lub inne podłoże do wykrywania drobnoustrojów beztlenowych ograniczyć wstrząsanie lub mieszanie do minimum, aby utrzymać warunki beztlenowe.

Ketgut i inne nici chirurgiczne do użytku weterynaryjnego. Na każde z podłoży użyć produkt w ilości nie mniejszej niż podano w tabeli 2.6.1.-2. Otworzyć opakowanie w warunkach aseptycznych i pobrać trzy odcinki zwoju na każde z podłoży. Do badania użyć 3 odcinki o długości 30 cm, pobierając z początku, środka i końca zwoju. Użyć całe zwoje ze świeżo otwartych opakowań kasetonowych. Przenieść każdy z odcinków do wybranych podłoży. Użyć wystarczającą ilość podłoża tak, aby przykrywała cały materiał badany (20 ml do 150 ml).

OBSERWACJA I INTERPRETACJA WYNIKÓW

W czasie inkubacji okresowo i końcowo kontrolować podłoża w kierunku pojawienia się widocznego makroskopowo wzrostu drobnoustrojów. Jeżeli badany produkt powoduje zmętnienie podłoża, uniemożliwiając łatwe wizualne stwierdzenie wzrostu lub braku wzrostu drobnoustrojów, po upływie 14 dni od rozpoczęcia badania, przenieść porcje podłoża (każda nie mniejsza niż 1 ml) do nowych pojemników z takim samym podłożem i inkubować pojemniki z badania pierwotnego i z przesiewu co najmniej 4 dni.

Jeżeli nie stwierdza się wzrostu drobnoustrojów, badany produkt spełnia wymagania badania jałowości. W przypadku stwierdzenia wzrostu drobnoustrojów produkt nie spełnia

Tabela 2.6.1 .-2. Minimalna ilość posiewana na każde z podioży

Ilość w pojemniku	Minimalna ilość posiewana na każde z podłoży, jeżeli nie zostało inaczej ustalone i zatwierdzone
Płyny -    mniej niż 1 ml -    1 ml - 40 ml -    więcej niż 40 ml, lecz nie więcej niż 100 ml -więcej niż 100 ml Płynne preparaty antybiotyków Inne preparaty rozpuszczalne w wodzie łub w mirystynianie izopropylu	Cała zawartość każdego pojemnika Połowa zawartości każdego pojemnika, jednak nie mniej niż 1 ml 20 ml 10% zawartości każdego pojemnika, jednak nie mniej niż 20 ml 1 ml Cała zawartość każdego pojemnika, nie mniej niż 200 mg
Nierozpuszczalne preparaty, kremy i maści, które zawiesza się lub emulguje	Cała zawartość każdego pojemnika, nie mniej niż 200 mg
Substancje stałe -    mniej niż 50 mg -    50 mg lub więcej, lecz mniej niż 300 mg -    od 300 mg do 5 g -    więcej niż 5 g	Cała zawartość każdego pojemnika Połowa zawartości każdego pojemnika, jednak nie mniej niż 50 mg 150 mg 500 mg
Ketgut i inne nici chirurgiczne do użytku weterynaryjnego	3 odcinki zwoju (każdy o długości 30 cm)

Wskazówki ogólne ” (1) odnoszą się do wszystkich monografii i innych tekstów

245