cytów w mleku również powoduje szybszą redukcję resazuryny niż błękitu metyle nowego.
Próba reduktazowa z resazuryną
Sprzęt: wyjałowiona pipeta o pojemności 10 cm , wyjałowiona pipeta o po jemności 1 cm1, dwie wyjałowione probówki o pojemności ok. 15 cm1, wyjałowić ny korek, łaźnia wodna z termoregulacją.
Odczynnik: roztwór resazuryny.
> Roztwór podstawowy (0,1 g sproszkowanej resazuryny rozpuścić w 200 cm' gorącej, świeżo przegotowanej wody destylowanej; przechowywać w butelce z cie mnego szkła w lodówce +4°C),
>- Roztwór roboczy (do 50 cm1 świeżo przegotowanej wody destylowanej dodać 5 cm1 roztworu podstawowego resazuryny; dobrze wymieszać i przechowywać tak jak roztwór podstawowy, ale nie dłużej niż 8 dni).
3
Wykonanie oznaczenia. Do jałowej probówki wlać 10 cm mleka, używając w tym celu także jałowej pipety, po czym dodać 1 cm1 roztworu resazu ryny. Probówkę zamknąć korkiem gumowym i wymieszać barwnik z mlekiem. Następnie wstawić do łaźni wodnej (temp. 35-37°C) bez dostępu światła. Po upływie 30 min probówkę wyjąć z łaźni wodnej i odczytać zabarwienie mleka.
Interpretacja wyników: ocenę mleka przeprowadzić z uwzględnieniem skali barw resazuryny (tab. 139).
TABELA 139. Ocena mleka w próbie reduktorowej resazuryny
Charakterystyka mleka wg barwy |
Ocena mleka |
Od stalowoniebieskiej do pastelowoniebieskiej |
zadowalająca |
Od niebieskofioletowej do różowofioletowej |
wątpliwa |
Od różowej do białej |
zła |
Próba reduktazowa z błękitem metylenowym
Wykonanie oznaczenia. Do jałowej probówki o pojemności około
O O
20 cm odmierzyć 10 cm badanego mleka, uważając, aby nie dotknąć pipetą ścia-
O
TABELA 140. Ocena mleka w próbce reduktazowej z błękitem metylenowym
Czas odbarwiania |
Ocena mleka |
błękitu metylenowego | |
(h) | |
powyżej 5,5 |
dobra |
2,0-5,5 |
średnia |
0,5-2,0 |
zła |
poniżej 0,5 |
bardzo zła |
ny probówki. Dodać 0,5 cm roboczego roztworu błękitu metylenowego, dokładnie mieszać, zamknąć korkiem gumowym i wstawić do łaźni wodnej o temp. 35-37°C, bez dostępu światła. Co 30 min obserwować zawartość probówki po uprzednim zamieszaniu jej przez jednostronne odwrócenie. Wraz z badaną próbką wstawić do łaźni wodnej probówkę kontrolną, do której wstawić termometr. Czas inkubacji mierzy się od chwili, gdy temperatura mleka w probówce kontrolnej osiągnie 35°C. Próbę uznaje się za zakończoną, gdy cały słupek mleka w probówce (dopuszcza się nieodbarwienie górnej warstwy grubości 0,5 cm) całkowicie się odbarwi. Wynik podaje się w godzinach. Czas całkowitego odbarwienia podaje się w godzinach.
Interpretacja wyników. Ocenę mleka określa się na podstawie części odbarwienia błękitu metylenowego (tab. 140).
Mleko pochodzące od krów z mastitis może różnić się od mleka normalnego nie tylko obecnością bakterii, wzrostem komórek somatycznych, ale i składem chemicznym. Zmiany te obejmują wszystkie składniki jego suchej masy. Mleko takie jest mniej cennym surowcem w przetwórstwie, trudniej w nim kontrolować przebieg fermentacji mlekowej, pogarsza się jakość gotowego produktu.
Podstawowym wskaźnikiem stanu zapalnego w wymieniu, niezależnie od jego przyczyny, jest wzrost liczby elementów komórkowych w postaci leukocytów i'ko-mórek nabłonkowych, a przy ostrym stanie zapalnym również obecność erytrocytów. Ilość komórek somatycznych, a głównie leukocytów, jest wprost proporcjonalna do nasilenia stanu zapalnego wymienia. Mleko wydojone ze zdrowego gruczołu mlecznego nie zawiera w 1 cm3 więcej niż 500 tys. komórek somatycznych. Pośrednimi wskaźnikami oceny normalności fizjologicznej mleka jest próba z płynem diagnostycznym Mastirapid oraz testu Whiteside’a.
Zasada metod. Zmiana konsystencji mleka pod wpływem odczynników zależy od stopnia zaawansowania stanu zapalnego wymienia (wzrostu liczby komórek somatycznych).
Sprzęt: wyjałowione dwie probówki o pojemności 20 cm , wyjałowiona pipeta o pojemności 1 cm1, łaźnia wodna z termoregulacją.
Odczynnik: roztwór błękitu metylenowego.
> Roztwór podstawowy (3,00 g sproszkowanego odczynnika rozpuścić w 100 cm1 96-procentowego alkoholu etylenowego; przechowywać w butelce z ciemnego szkła w lodówce, w temp. +4°C).
> Roztwór roboczy do 195 cm1 świeżo przegotowanej wody destylowanej dodać jałową pipetą 5 cm1 podstawowego roztworu błękitu metylenowego i dobrze wymieszać, przechowywać tak jak roztwór podstawowy, ale nie dłużej niż 8 dni.