ZASADY, TECHNIKA

ZASADY, TECHNIKA

PRACY ORAZ SPRZĘT

PRACY ORAZ SPRZĘT

STOSOWANY

STOSOWANY

W LABORATORIUM

W LABORATORIUM

MIKROBIOLOGICZNYM

MIKROBIOLOGICZNYM

Podstawowa aparatura w

Podstawowa aparatura w

pracowni

pracowni

mikrobiologicznej:

mikrobiologicznej:



autoklaw oraz aparat Kocha do wyjaławiania

autoklaw oraz aparat Kocha do wyjaławiania

pożywek i niszczenia drobnoustrojów

pożywek i niszczenia drobnoustrojów



sterylizator na suche gorące powietrze

sterylizator na suche gorące powietrze



suszarka do suszenia szkła laboratoryjnego

suszarka do suszenia szkła laboratoryjnego



cieplarka do hodowli drobnoustrojów

cieplarka do hodowli drobnoustrojów



chłodziarka do przechowywania szczepów i

chłodziarka do przechowywania szczepów i

pożywek

pożywek



mikroskop z obiektywem imersyjnym

mikroskop z obiektywem imersyjnym



lupy do oglądania hodowli drobnoustrojów

lupy do oglądania hodowli drobnoustrojów



waga techniczna i analityczna

waga techniczna i analityczna



pehametr do oznaczania pH pożywek

pehametr do oznaczania pH pożywek



aparat do hodowli w warunkach beztlenowych

aparat do hodowli w warunkach beztlenowych

Podstawowy sprzęt:

Podstawowy sprzęt:



ezy

ezy



pincety

pincety



skalpele

skalpele



nożyczki

nożyczki



palniki

palniki



trójnogi

trójnogi



siatki laboratoryjne

siatki laboratoryjne



statywy do probówek

statywy do probówek



puszki metalowe do pipet i płytek

puszki metalowe do pipet i płytek



termometry

termometry

Podstawowe szkło

Podstawowe szkło

laboratoryjne:

laboratoryjne:



probówki bakteriologiczne duże i małe

probówki bakteriologiczne duże i małe



płytki Petriego o różnych średnicach

płytki Petriego o różnych średnicach



pipety bakteriologiczne z podziałką,

pipety bakteriologiczne z podziałką,

pojemności 1cm

pojemności 1cm

³

³

i 10cm

i 10cm

³

³



pipety pasteurowskie

pipety pasteurowskie



kolby i butelki do przechowywania

kolby i butelki do przechowywania

pożywek i odczynników

pożywek i odczynników



kolby płaskodenne różnej pojemności

kolby płaskodenne różnej pojemności



cylindry pomiarowe

cylindry pomiarowe



szkiełka przedmiotowe i nakrywkowe do

szkiełka przedmiotowe i nakrywkowe do

preparatów mikroskopowych

preparatów mikroskopowych



bagietki szklane, łyżeczki porcelanowe

bagietki szklane, łyżeczki porcelanowe

METODY NISZCZENIA

METODY NISZCZENIA

DROBNOUSTROJÓW

DROBNOUSTROJÓW

1. Metody fizyczne:

1. Metody fizyczne:



Sterylizacja cieplna sucha-polega na wyżarzaniu w

Sterylizacja cieplna sucha-polega na wyżarzaniu w

płomieniu palnika ez, opalanie brzegów probówek i kolbek

płomieniu palnika ez, opalanie brzegów probówek i kolbek

oraz bagietek szklanych. Do tego rodzaju sterylizacji

oraz bagietek szklanych. Do tego rodzaju sterylizacji

zaliczamy także wyjaławianie szkła laboratoryjnego w

zaliczamy także wyjaławianie szkła laboratoryjnego w

suszarce w temperaturze około 160˚C przez 2 godziny.

suszarce w temperaturze około 160˚C przez 2 godziny.



Sterylizacja cieplna z parą wodną- zaliczamy tutaj

Sterylizacja cieplna z parą wodną- zaliczamy tutaj

sterylizację w autoklawie w temperaturze powyżej 100˚C i

sterylizację w autoklawie w temperaturze powyżej 100˚C i

pod ciśnieniem około 1,5 atmosfery przez 20 minut, a

pod ciśnieniem około 1,5 atmosfery przez 20 minut, a

także sterylizację w aparacie Kocha. Można też

także sterylizację w aparacie Kocha. Można też

przeprowadzić w tym aparacie zabieg jednokrotny w

przeprowadzić w tym aparacie zabieg jednokrotny w

temperaturze około 95˚C przez 30 minut.

temperaturze około 95˚C przez 30 minut.



Do tej grupy zalicza się w niektórych przypadkach

Do tej grupy zalicza się w niektórych przypadkach

sterylizację przez gotowanie.

sterylizację przez gotowanie.



Wyjaławianie promieniami ultrafioletowymi przy pomocy

Wyjaławianie promieniami ultrafioletowymi przy pomocy

lamp kwarcowych

lamp kwarcowych

2. Metody mechaniczne:

2. Metody mechaniczne:

Wyjałowienie cieczy możemy uzyskać poprzez

Wyjałowienie cieczy możemy uzyskać poprzez

oddzielenie mikroorganizmów przy pomocy

oddzielenie mikroorganizmów przy pomocy

specjalnych filtrów bakteriologicznych o

specjalnych filtrów bakteriologicznych o

drobnych porach.

drobnych porach.

Istnieje wiele rodzajów takich filtrów

Istnieje wiele rodzajów takich filtrów

różniących się materiałem z którego są wykonane

różniących się materiałem z którego są wykonane

oraz konstrukcją:

oraz konstrukcją:

filtry Berkefelda wykonane z ziemi okrzemkowej,

filtry Berkefelda wykonane z ziemi okrzemkowej,

filtry Chamberlana z nieglazurowanej porcelany,

filtry Chamberlana z nieglazurowanej porcelany,

filtry azbestowe,

filtry azbestowe,

filtry Schotta ze spiekanego szkła,

filtry Schotta ze spiekanego szkła,

filtry membranowe przygotowane z kolodium,

filtry membranowe przygotowane z kolodium,

żelatyny lub pergaminu.

żelatyny lub pergaminu.

3. Metody chemiczne

3. Metody chemiczne

(dezynfekcja):

(dezynfekcja):

Przy pomocy substancji chemicznych można

Przy pomocy substancji chemicznych można

przeprowadzić dezynfekcję różnych przedmiotów,

przeprowadzić dezynfekcję różnych przedmiotów,

płynów, pomieszczeń. W tym celu można

płynów, pomieszczeń. W tym celu można

zastosować:

zastosować:



Kwasy i zasady, jak np. mleko wapienne, od 1% do

Kwasy i zasady, jak np. mleko wapienne, od 1% do

10% gorące roztwory węglanu sodowego, mydła.

10% gorące roztwory węglanu sodowego, mydła.



Środki utleniajace: chlorowce i ich pochodne,

Środki utleniajace: chlorowce i ich pochodne,

nadmanganian potasowy, woda utleniona, 10%

nadmanganian potasowy, woda utleniona, 10%

roztwór jodu (jodyna), chloramina.

roztwór jodu (jodyna), chloramina.



Sole metali ciężkich, zwłaszcza rtęci i srebra.

Sole metali ciężkich, zwłaszcza rtęci i srebra.



Rozpuszczalniki organiczne: 60-70% alkohol, 5%

Rozpuszczalniki organiczne: 60-70% alkohol, 5%

roztwór fenolu, krezole, lizol, formalina.

roztwór fenolu, krezole, lizol, formalina.



Substancje zmniejszające napięcie

Substancje zmniejszające napięcie

powierzchniowe-detergenty.

powierzchniowe-detergenty.

Pożywki hodowlane

Pożywki hodowlane

,

,

nazywane też podłożami

nazywane też podłożami

mikrobiologicznymi,

mikrobiologicznymi,

są mieszaninami

są mieszaninami

odpowiednio dobranych

odpowiednio dobranych

składników.

składników.

Służą do hodowli

Służą do hodowli

mikroorganizmów w

mikroorganizmów w

warunkach laboratoryjnych,

warunkach laboratoryjnych,

w naczyniach (czyli

w naczyniach (czyli

hodowlach

hodowlach

in vitro

in vitro

-

-

dosłownie

dosłownie

w szkle

w szkle

).

).

Podział pożywek na

Podział pożywek na

podstawie pochodzenia

podstawie pochodzenia

składników z których

składników z których

zostały przygotowane:

zostały przygotowane:



naturalne - zawierają składniki

naturalne - zawierają składniki

pochodzenia naturalnego, np. wyciągi z

pochodzenia naturalnego, np. wyciągi z

tkanek roślinnych lub zwierzęcych,

tkanek roślinnych lub zwierzęcych,

ekstrakt glebowy, mleko, jaja, surowicę

ekstrakt glebowy, mleko, jaja, surowicę

krwi itp.

krwi itp.



syntetyczne - przygotowane z różnych

syntetyczne - przygotowane z różnych

substancji chemicznych

substancji chemicznych



półsyntetyczne - zawierające składniki

półsyntetyczne - zawierające składniki

naturalne jak też różne odczynniki

naturalne jak też różne odczynniki

chemiczne

chemiczne

Podział pożywek na podstawie

Podział pożywek na podstawie

stopnia ich złożoności oraz

stopnia ich złożoności oraz

sposobu zaspakajania

sposobu zaspakajania

potrzeb pokarmowych

potrzeb pokarmowych

mikroorganizmów:

mikroorganizmów:



proste - nazywane też zwykłymi lub podstawowymi,

proste - nazywane też zwykłymi lub podstawowymi,

stosowane do hodowli mikroorganizmów o niskich

stosowane do hodowli mikroorganizmów o niskich

wymaganiach odżywczych lub jako materiał

wymaganiach odżywczych lub jako materiał

wyjściowy do sporządzania pożywek złożonych

wyjściowy do sporządzania pożywek złożonych



złożone - zawierają dodatek substancji

złożone - zawierają dodatek substancji

wzrostowych, witamin, specjalnych źródeł węgla,

wzrostowych, witamin, specjalnych źródeł węgla,

służą do hodowli mikroorganizmów o wysokich

służą do hodowli mikroorganizmów o wysokich

wymaganiach.

wymaganiach.

Do tej grupy zalicza się podłoża selektywne oraz

Do tej grupy zalicza się podłoża selektywne oraz

różnicujące.

różnicujące.

Podział pożywek w zależności

Podział pożywek w zależności

od celu badań i charakteru

od celu badań i charakteru

hodowanych

hodowanych

mikroorganizmów

mikroorganizmów

(stosujemy podłoża o różnej

(stosujemy podłoża o różnej

konsystencji):

konsystencji):



płynne (bulion, podłoża mineralne,

płynne (bulion, podłoża mineralne,

brzeczka)

brzeczka)



stałe (zestalone agarem lub żelatyną)

stałe (zestalone agarem lub żelatyną)



półpłynne (zestalone małą ilością

półpłynne (zestalone małą ilością

agaru)

agaru)

Typy podłoży bakteriologicznych w probówkach; Wzrost grzyba

Typy podłoży bakteriologicznych w probówkach; Wzrost grzyba

Histoplasma capsulatum

Histoplasma capsulatum

a – w postaci skosu,

a – w postaci skosu,

b – w postaci słupka

b – w postaci słupka

Do podstawowych

Do podstawowych

czynności w technice

czynności w technice

mikrobiologicznej należą:

mikrobiologicznej należą:



posiew (szczepienie) czyli

posiew (szczepienie) czyli

wprowadzenie badanego materiału

wprowadzenie badanego materiału

do odpowiedniej pożywki

do odpowiedniej pożywki



przesiew (przeszczepianie) czyli

przesiew (przeszczepianie) czyli

przenoszenie drobnoustrojów z

przenoszenie drobnoustrojów z

jednej pożywki na drugą

jednej pożywki na drugą

Przy posiewie do pożywki

Przy posiewie do pożywki

płynnej wystarczy

płynnej wystarczy

zanurzyć w niej oczko,

zanurzyć w niej oczko,

natomiast przy posiewie

natomiast przy posiewie

do pożywki zestalonej są

do pożywki zestalonej są

dwie możliwości:

dwie możliwości:



wykonanie posiewu rysowego

wykonanie posiewu rysowego



wykonanie posiewu kłutego

wykonanie posiewu kłutego

Mikroskop stanowi

Mikroskop stanowi

podstawowy przyrząd do

podstawowy przyrząd do

badania drobnoustrojów.

badania drobnoustrojów.

W zależności od sposobu

W zależności od sposobu

uzyskiwania powiększenia

uzyskiwania powiększenia

wyróżniamy mikroskopy:

wyróżniamy mikroskopy:



Świetlne (optyczne)

Świetlne (optyczne)



Elektronowe

Elektronowe

W mikroskopach świetlnych

W mikroskopach świetlnych

powiększenia uzyskuje się

powiększenia uzyskuje się

dzięki układowi soczewek

dzięki układowi soczewek

optycznych. Należą do nich

optycznych. Należą do nich

następujące typy

następujące typy

mikroskopów:

mikroskopów:



Z jasnym polem widzenia

Z jasnym polem widzenia



Z ciemnym polem widzenia

Z ciemnym polem widzenia



Do obserwacji w ultrafiolecie

Do obserwacji w ultrafiolecie



Fluorescencyjny

Fluorescencyjny



Kontrastowo-fazowy

Kontrastowo-fazowy



Konfokalny

Konfokalny

Mikroskop optyczny zwykły ( z

Mikroskop optyczny zwykły ( z

jasnym polem widzenia )

jasnym polem widzenia )

składa się z dwóch

składa się z dwóch

zasadniczych układów:

zasadniczych układów:



mechanicznego- statywu, stolika, tubusu

mechanicznego- statywu, stolika, tubusu

i dwóch śrub makrometrycznej i

i dwóch śrub makrometrycznej i

mikrometrycznej

mikrometrycznej



optycznego- obiektywu, okularu,

optycznego- obiektywu, okularu,

aparatu oświetlającego i lusterka

aparatu oświetlającego i lusterka

Części mechaniczne

Części mechaniczne

Tworzą one rusztowanie dla

Tworzą one rusztowanie dla

układu optycznego.

układu optycznego.



Podstawa-najczęściej w postaci ciężkiej metalowej

Podstawa-najczęściej w postaci ciężkiej metalowej

płyty, zapewnia stabilność przyrządowi i jest

płyty, zapewnia stabilność przyrządowi i jest

wyposażona w oświetlacz (źródło światła).

wyposażona w oświetlacz (źródło światła).



Statyw-jest stalową konstrukcją łączącą wszystkie

Statyw-jest stalową konstrukcją łączącą wszystkie

części mikroskopu. Ma kształt kabłąka i stanowi

części mikroskopu. Ma kształt kabłąka i stanowi

zarazem uchwyt do przenoszenia mikroskopu.

zarazem uchwyt do przenoszenia mikroskopu.



Tubus-jest to metalowa rura przystosowana w

Tubus-jest to metalowa rura przystosowana w

górnej części do zakładania okularu lub nasadki, w

górnej części do zakładania okularu lub nasadki, w

dolnej zaś zakończona tarczą obrotową zwaną

dolnej zaś zakończona tarczą obrotową zwaną

rewolwerem, w której znajdują się obiektywy.

rewolwerem, w której znajdują się obiektywy.



Śruba makrometryczna umożliwia znalezienie

Śruba makrometryczna umożliwia znalezienie

obrazu

obrazu



Śruba mikrometryczna służy do ustawiania

Śruba mikrometryczna służy do ustawiania

właściwej ostrości obrazu

właściwej ostrości obrazu

Części optyczne

Części optyczne



Aparat oświetlający (ap.Abbego) znajduje się pod stolikiem i

Aparat oświetlający (ap.Abbego) znajduje się pod stolikiem i

kieruje promienie świetlne od źródła światła poprzez preparat

kieruje promienie świetlne od źródła światła poprzez preparat

do obiektywu. Jest umieszczony w oprawce złączonej z

do obiektywu. Jest umieszczony w oprawce złączonej z

podstawą mikroskopu.

podstawą mikroskopu.



Oświetlenie preparatu

Oświetlenie preparatu



Obecnie mikroskopy mają wbudowane w podstawę

Obecnie mikroskopy mają wbudowane w podstawę

urządzenia oświetlające. Oświetlacze te są zaopatrzone w

urządzenia oświetlające. Oświetlacze te są zaopatrzone w

przysłonę i matówkę.

przysłonę i matówkę.



Obiektywy są umieszczone na tarczy obrotowej. Mikroskop

Obiektywy są umieszczone na tarczy obrotowej. Mikroskop

optyczny ma przeważnie 3-5 obiektywów powiększających od

optyczny ma przeważnie 3-5 obiektywów powiększających od

3 do 150 razy. Obiektywy są zbudowane z kilku lub kilkunastu

3 do 150 razy. Obiektywy są zbudowane z kilku lub kilkunastu

soczewek skupiających, sklejonych balsamem kanadyjskim,

soczewek skupiających, sklejonych balsamem kanadyjskim,

umieszczonych w oprawce metalowej. Najbardziej zewnętrzna

umieszczonych w oprawce metalowej. Najbardziej zewnętrzna

soczewka nosi nazwę czołowej i jest narażona na uszkodzenia.

soczewka nosi nazwę czołowej i jest narażona na uszkodzenia.



Obiektywy dzielimy na suche (powietrzne) oraz zanurzeniowe

Obiektywy dzielimy na suche (powietrzne) oraz zanurzeniowe

(immersyjne).

(immersyjne).



Okulary są zbudowane z zespołu soczewek płasko-wypukłych i

Okulary są zbudowane z zespołu soczewek płasko-wypukłych i

powiększają na zasadzie lupy. Powiększają one od 2-30 razy.

powiększają na zasadzie lupy. Powiększają one od 2-30 razy.

Zasada działania

Zasada działania

mikroskopu

mikroskopu

Podstawowe parametry

Podstawowe parametry

charakteryzujące

charakteryzujące

mikroskop:

mikroskop:



Powiększenie mikroskopu

Powiększenie mikroskopu



Zdolność rozdzielcza

Zdolność rozdzielcza



Odległość robocza

Odległość robocza



Przestrzeń robocza

Przestrzeń robocza

Powiększenie mikroskopu jest iloczynem

Powiększenie mikroskopu jest iloczynem

powiększenia obiektywu i okularu.

powiększenia obiektywu i okularu.

Zdolność rozdzielcza mikroskopu określa,

Zdolność rozdzielcza mikroskopu określa,

jak blisko siebie mogą leżeć dwa punkty,

jak blisko siebie mogą leżeć dwa punkty,

aby patrząc na nie przez mikroskop można

aby patrząc na nie przez mikroskop można

je było widzieć jako punkty oddzielne.

je było widzieć jako punkty oddzielne.

Zdolność rozdzielcza zależy wyłącznie od

Zdolność rozdzielcza zależy wyłącznie od

obiektywu.

obiektywu.

Odległość robocza jest to odległość

Odległość robocza jest to odległość

pomiędzy soczewką czołową obiektywu a

pomiędzy soczewką czołową obiektywu a

preparatem w momencie prawidłowego

preparatem w momencie prawidłowego

ustawienia ostrości obrazu.

ustawienia ostrości obrazu.

Przestrzeń robocza jest to przestrzeń

Przestrzeń robocza jest to przestrzeń

między soczewką czołową obiektywu a

między soczewką czołową obiektywu a

preparatem w chwili najlepszego widzenia.

preparatem w chwili najlepszego widzenia.

Mikroskop do oglądania w

Mikroskop do oglądania w

ciemnym polu widzenia

ciemnym polu widzenia

Przy jego konstrukcji wykorzystano

Przy jego konstrukcji wykorzystano

tzw. efekt Tyndalla. Specjalnie

tzw. efekt Tyndalla. Specjalnie

skonstruowany kondensor kieruje

skonstruowany kondensor kieruje

promienie światła ukośnie do

promienie światła ukośnie do

powierzchni szkiełka przedmiotowego.

powierzchni szkiełka przedmiotowego.

Promienie odbijają się od powierzchni

Promienie odbijają się od powierzchni

i powracają do kondensora, a pole

i powracają do kondensora, a pole

widzenia pozostaje ciemne. Gdy

widzenia pozostaje ciemne. Gdy

promienie natrafią na komórki

promienie natrafią na komórki

drobnoustrojów, ulegają załamaniu lub

drobnoustrojów, ulegają załamaniu lub

ugięciu i wskutek rozproszenia

ugięciu i wskutek rozproszenia

wpadają do obiektywu. W efekcie

wpadają do obiektywu. W efekcie

uzyskuje się jasno oświetlone punkty

uzyskuje się jasno oświetlone punkty

na tle ciemnego pola.

na tle ciemnego pola.

Mikroskop do oglądania w

Mikroskop do oglądania w

ultrafiolecie

ultrafiolecie

Używając jako źródła światła

Używając jako źródła światła

promieni ultrafioletowych (180-

promieni ultrafioletowych (180-

400 nm), możemy oglądać

400 nm), możemy oglądać

komórki o wielkości 0,1µm.

komórki o wielkości 0,1µm.

Soczewki w tym mikroskopie są

Soczewki w tym mikroskopie są

wykonane z kwarcu, gdyż

wykonane z kwarcu, gdyż

przepuszcza on promienie

przepuszcza on promienie

ultrafioletowe. Ponieważ

ultrafioletowe. Ponieważ

promieniowanie to jest

promieniowanie to jest

niewidoczne, obrazy otrzymuje się

niewidoczne, obrazy otrzymuje się

na kliszy fotograficznej lub na

na kliszy fotograficznej lub na

ekranie telewizyjnym.

ekranie telewizyjnym.

Mikroskop fluorescencyjny

Mikroskop fluorescencyjny

Pewne substancje chemiczne

Pewne substancje chemiczne

absorbują energię fal ultrafioletowych

absorbują energię fal ultrafioletowych

i emitują ją jako fale widzialne

i emitują ją jako fale widzialne

większej długości. Takie substancje

większej długości. Takie substancje

mogą mieć określone zabarwienie w

mogą mieć określone zabarwienie w

świetle normalnym i całkowicie inną

świetle normalnym i całkowicie inną

barwę w świetle ultrafioletowym.

barwę w świetle ultrafioletowym.

Związki te nazywa się związkami

Związki te nazywa się związkami

fluorescencyjnymi, a zjawisko –

fluorescencyjnymi, a zjawisko –

fluorescencją. Jeśli wiec zawiesinę

fluorescencją. Jeśli wiec zawiesinę

bakterii nasyci się tymi związkami to

bakterii nasyci się tymi związkami to

organizmy reagujące z tymi związkami

organizmy reagujące z tymi związkami

staną się fluoryzujące i będzie możliwa

staną się fluoryzujące i będzie możliwa

ich obserwacja w mikroskopie, którego

ich obserwacja w mikroskopie, którego

pole widzenia jest oświetlone światłem

pole widzenia jest oświetlone światłem

ultrafioletowym.

ultrafioletowym.

Mikroskop kontrastowo-fazowy

Mikroskop kontrastowo-fazowy

Jest szczególnie przydatny do badania

Jest szczególnie przydatny do badania

żywych komórek. Większość

żywych komórek. Większość

mikroorganizmów jest bezbarwna i prawie

mikroorganizmów jest bezbarwna i prawie

przeźroczysta, w skutek czego są one słabo

przeźroczysta, w skutek czego są one słabo

widoczne pod mikroskopem. Dlatego też

widoczne pod mikroskopem. Dlatego też

stosuję się różne metody barwienia

stosuję się różne metody barwienia

umożliwiające dostrzeżenie zabarwionych

umożliwiające dostrzeżenie zabarwionych

komórek. Metoda kontrastu fazowego

komórek. Metoda kontrastu fazowego

umożliwia dokładną obserwację obiektów

umożliwia dokładną obserwację obiektów

bez konieczności ich barwienia.

bez konieczności ich barwienia.

Zasada działania polega na przesunięciu fali

Zasada działania polega na przesunięciu fali

światła o 180° między promieniami

światła o 180° między promieniami

przechodzącymi przez obserwowany

przechodzącymi przez obserwowany

przedmiot a ugiętymi na preparacie. Pozwala

przedmiot a ugiętymi na preparacie. Pozwala

to na stworzenie kontrastu, który umożliwia

to na stworzenie kontrastu, który umożliwia

rozróżnienie szczegółów budowy oglądanych

rozróżnienie szczegółów budowy oglądanych

obiektów.

obiektów.

Mikroskop konfokalny

Mikroskop konfokalny

Użycie światła laserowego

Użycie światła laserowego

wprowadzonego do mikroskopu

wprowadzonego do mikroskopu

od strony okularu skanuje pole

od strony okularu skanuje pole

widzenia. Dzięki temu obraz

widzenia. Dzięki temu obraz

jest oświetlany punkt po

jest oświetlany punkt po

punkcie, wyłącznie w

punkcie, wyłącznie w

płaszczyźnie ostrości obrazu.

płaszczyźnie ostrości obrazu.

Mikroskop ten ma duże

Mikroskop ten ma duże

zastosowanie w badaniach

zastosowanie w badaniach

cytologicznych.

cytologicznych.

Mikroskop elektronowy

Mikroskop elektronowy

Tutaj rolę światła odgrywają

Tutaj rolę światła odgrywają

wiązki elektronów o bardzo małej

wiązki elektronów o bardzo małej

długości fali biegnących w

długości fali biegnących w

wysokiej próżni. Rolę soczewek

wysokiej próżni. Rolę soczewek

spełniają soczewki

spełniają soczewki

elektrostatyczne lub

elektrostatyczne lub

elektromagnetyczne.

elektromagnetyczne.

Obraz przedmiotu może być

Obraz przedmiotu może być

widoczny na specjalnym ekranie

widoczny na specjalnym ekranie

fluorescencyjnym lub

fluorescencyjnym lub

fotografowany na płycie

fotografowany na płycie

fotograficznej przez wmontowany

fotograficznej przez wmontowany

w mikroskop aparat fotograficzny.

w mikroskop aparat fotograficzny.

Powiększenia uzyskiwane sięgają

Powiększenia uzyskiwane sięgają

2 000 000 razy.

2 000 000 razy.

W zależności od kierunku

W zależności od kierunku

badań wykonuje się różne

badań wykonuje się różne

rodzaje preparatów:

rodzaje preparatów:



przyżyciowe, w których obserwuje

przyżyciowe, w których obserwuje

się drobnoustroje żywe

się drobnoustroje żywe



utrwalone i barwione, w których

utrwalone i barwione, w których

drobnoustroje są martwe

drobnoustroje są martwe

Preparaty przyżyciowe

Preparaty przyżyciowe

mogą być wykonywane w

mogą być wykonywane w

postaci:

postaci:



kropli spłaszczonej

kropli spłaszczonej



kropli wiszącej

kropli wiszącej

Preparaty utrwalone i

Preparaty utrwalone i

barwione

barwione



mazany

mazany



odciskowy

odciskowy

W przygotowaniu

W przygotowaniu

preparatu wyróżnia się

preparatu wyróżnia się

trzy etapy:

trzy etapy:



przygotowanie preparatu

przygotowanie preparatu



utrwalenie preparatu

utrwalenie preparatu



barwienie preparatu

barwienie preparatu

Można stosować barwienie

Można stosować barwienie



proste stosując jeden barwnik np.

proste stosując jeden barwnik np.

błękit metylenowy lub fuksynę

błękit metylenowy lub fuksynę

zasadową

zasadową



złożone stosując co najmniej dwa

złożone stosując co najmniej dwa

barwniki, najczęściej metodą Grama

barwniki, najczęściej metodą Grama