OTRZYMYWANIE CHLORKU RUBROBRASSYCYNY Z CZEROWNEJ KAPUSTY

Rubrobrassycyna jest glikozydem rubrobrassyny. Celem ćwiczenia jest wyodrębnienie chlorku rubrobrassycyny z suszonych liści czerwonej kapusty i zbadanie jego punktu zmiany barwy.

A. Ekstrakcja i wytrącenie.

50 g suszu kapusty zalaliśmy metanolem zawierającym 2% chlorowodór i pozostawiliśmy w ciemnym miejscu na tydzień w celu wyekstrahowania surowego chlorku rubrobrassycyny. Po tym czasie ekstrakt odsączyliśmy a pozostały na sączku materiał przemyliśmy metanolem zawierający 1% chlorowodór. Następnie połączone przesącze zatężyliśmy do objętości 50 ml w temp 45°C i dodaliśmy podwójną ilość eteru w celu wytrącenia osadu. Zdekantowaliśmy roztwór znad osadu.

B. Wytrącanie soli ołowiu (II).

Uzyskany osad rozpuściliśmy w gorącym metanolu, następnie oziębiliśmy i przesączyliśmy na sączku. Do przesączu dodaliśmy eteru w celu wytrącenia osadu. Otrzymany osad rozpuściliśmy w wodzie i powoli wkraplaliśmy do niego 33% wodny roztwór wodnego octanu ołowiu (II), który spowodował wytrącenie soli ołowiu barwnika. Wkraplaliśmy do czasu aż czerwono-fioletowa barwa tego roztworu zmieni się na niebiesko-fioletową. Mieszaninę pozostawiliśmy na 24 godziny po czym niebiesko zabarwioną sól ołowiu (II) barwnika odsączyliśmy, a osad przemyliśmy na sączku gorącym metanolu i wysuszyliśmy.

C. Otrzymywanie chlorku rubrobrassycyny.

Otrzymaną sól ołowiu (II) zawiesiliśmy w 2% roztworze chlorowodoru w metanolu. Zabieg ten pozwolił nam wytrącić chlorek ołowiu (II), który następnie odsączyliśmy i do otrzymanego przesączu dodaliśmy eteru. Wytrącony osad przesączyliśmy, przepłukaliśmy eterem i wyszyliśmy. Otrzymany na sączku osad chlorku rubrobrassycyny (II) miał zabarwienie różowe.

D. Oznaczenie punktu zmiany barwy.

Sączek z osadem chlorku rubrobrassycyny (II) rozpuściliśmy w wodzie a następnie miareczkowaliśmy w biurecie używając jako titranta 0,01 M roztwór KOH, mierząc jednocześnie pH roztworu. Wraz ze wzrostem pH następowała zmiana barwy.

Zmiana barwy roztworu pod wpływem pH.

pH	kolor
2,9	czerwono-różowy
3,5	fioletowy
4	niebieski
6,5	morski
9	malachitowy
12	butelkowa zieleń

E. Wyznaczanie widma absorpcyjnego.

Wykonaliśmy pomiary absorbancji w zakresie od 240- 490 nm. Wyniki w zakresie ultrafioletu wyszły nieczytelne, dlatego dokonaliśmy powtórnego pomiaru w zakresie światła widzialnego 400- 600 nm. Maksimum absorpcji wynosiło 535 nm.

Małgorzata Proboszcz

Joanna Wójtowicz