• K_m - określa powinowactwo substratu do enzymu; stężenie substratu, przy

którym szybkość reakcji równa się 0.5•V_max; jednostki stężenia [=] M;

najczęstsze wartości w zakresie stężeń μM-mM

• k₂ ≡ k_kat - stała szybkości reakcji powstawania produktu, tzw. liczba obrotów - ilość moli produktu tworzonych w jednostce czasu (s) przez jeden mol enzymu; jednostki odwrotności czasu [=] s^-1, wartości wahają się w granicach od rzędu 10⁶ do mniejszych niż 1

• V_max - maksymalna prędkość katalizowanej reakcji przy danym stężeniu enzymu - aktywność enzymu; jednostki stężenia/czas, najczęściej stosowane μM/s lub mM/s

• k_kat /K_m - najlepiej określa skuteczność enzymu, jego sprawność przy stężeniach substratu znacznie poniżej wartości K_m (odpowiada to często warunkom fizjologicznym); dla najskuteczniejszych enzymów k_kat /K_m ≈ k₁ co oznacza, że wydajność katalizowanych przez nie reakcji jest ograniczona jedynie dyfuzją cząsteczek w roztworze i nie może przekroczyć wartości 10⁸-10⁹ M^-1s^-1

wyznaczanie wartości K_m i V_max - stosowanie odwróconej postaci zależności M-M; wyrażenie Lineweavera-Burka - 1/v_o = 1/V_max + K_m/V_max • 1/[S_o] - wykres zależności 1/v_o od 1/[S_o] to linia prosta z charakterystycznymi punktami przecięcia osi 1/[S_o] = -1/ K_m a osi 1/v_o = 1/V_max

• jednostki międzynarodowe (IU, U): 1U to aktywność wytwarzająca 1μmol produktu/min

• katale: 1kat to aktywność wytwarzająca 1 mol produktu/s; 1katal=6•10⁷ U, 1U=16.67 nKat

b/ inhibicja odwracalna - przejściowe, odwracalne wiązanie inhibitorów co prowadzi do

czasowego wyłączenia cząsteczek enzymów wiążących inhibitor z udziału w katalizie

hamowanie kompetycyjne - inhibitor wykazuje strukturalne podobieństwo do substratu i konkuruje, współzawodniczy z nim o związanie się w centrum aktywnym (E∗): wytworzenie kompleksu z inhibitorem (E∗I) wyłącza enzymu z udziału w katalizie ale wzrost stężenia substratu usuwa efekt działania inhibitora - ↑[S] ⇒ ↑v_o , V^I_max = V_max , K^I_m = K_m•(1+ [I]/K_i) ; analiza wykresów obrazujących zależność v od [S] i 1/v od 1/[S];

hamowanie niekompetycyjne (klasyczne) - inhibitor nie wykazuje podobieństwa do substratu i łączy się zarówno z samym enzymem (E◊I) jak i z kompleksem enzym-substrat (I◊E∗S) w innym niż substrat miejscu powodując w obu przypadkach wyłączenie enzymu z udziału w katalizie, spadek jego aktywności (szybkości maksymalnej), w tym wypadku wzrost stężenia substratu nie wpływa na efekt działania inhibitora - ↑[S] v_o , K^I_m = K_m , V^I_max = V_max/(1+ [I]/K_i); analiza wykresów obrazujących zależność v od [S] i 1/v od 1/[S]

---