CCF20081011012

42 43

42 43

stanu mikrobiologicznego produktu (jałowości, jakości

Kyc. 13. Wytarzanie czy w płomieniu palnika

■j;

r<

Kyc. 14. Posiew (przesiew) ze skosu na skos

)¥

'•Ą

II

‘■t

|

»

*

Kyc. 15. Prawidłowy sposób trzymania probówek i korków przy posiewie

-    stwierdzenie mikroflory),

-    oznaczenie liczby drobnoustrojów w badanym materiale,

-    przygotowanie inokulatów do prowadzenia hodowli w warunkach doświadczalnych czy leż do celów przemysłowych.

Wszystkie czynności związane z posiewem należy prowadzić z zachowaniem warunków jałowości. Prawidłowo przeprowadzony posiew wymaga nic tylko jałowości naczyń, sprzętu i pożywek, lecz także pomieszczeń. Najlepiej wykonywać posiew w pomieszczeniu przeznaczonym do tego celu, wyposażonym w szafę laminarną.

Posiew wykonuje się przy palniku gazowym, opalając wyloty naczyń i pipet w płomieniu, a także wyżarzając używane podczas posiewu czy i igły (ryc. 12 i 13).

Posiewu drobnoustrojów dokonuje się czą, igłą lub pipetą. Niekiedy posiew przeprowadza się przy użyciu jałowych tamponów z waty lub gazy albo szklanych pręcików wygiętych pod specjalnym kątem, tzw. głaszczck.

Za pomocą czy wykonuje się posiewy na podłoża płynne i stałe. Ezę z pobranym materiałem zanurza się w pożywce płynnej, wymywając komórki z jej powierzchni. Na > pożywkach zestalonych natomiast, czy to w płytce Pctricgo. czy też w postaci skosu w probówce, posiewu dokonuje się punktowo, dotykając czą powierzchni pożywki albo pocierając powierzchnię zestalonego podłoża w sposób rysowy lub falisty (ryc. 14 i 15).

Dokonując posiewu igłą, wkłuwamy ją w słupek zestalonego podłoża (ryc. 16).

Do posiewu drobnoustrojów znajdujących się w środowisku płynnym służy pipeta. Za pomocą pipety zwykłej albo pasteurowskiej materiał można przenieść na pożywkę płynną lub zestaloną.

Posiew na podłoże zestalone można wykonać w dwojaki sposób:

Do wyjałowionej płytki Pelriego wprowadza się ściśle określoną objętość zawiesiny mikroorganizmów (0,5 lub 1,0 cm ), a następnie zalewa upłynnionym i odpowiednio ochłodzonym (do około 50 C) podłożem stałym. Poczym zawartość płytki miesza się, delikatnie poruszając płytkę, ruchem kolistym po powierzchni stołu w celu równomiernego rozprowadzenia posianego materiału. Ten sposób dokonywania posiewu, okicślnny jako metoda zalewowa, jest wykorzystywany w posiewach ilościowych oraz przy izolacji czystych kultur.

Kyc. 16. Sposób posiewu na słupek

Drugi sposób polega na posiewie powierzchniowym zawiesiny drobnoustrojów na uprzednio zestalonej pożywce w płytce Pelriego. Zawiesinę rozprowadzamy po całej powierzchni podłoża za pomocą czy lub głuszczki (ryc. 17).

Używając jałowych tamponów dokonujemy wymazów z powierzchni. Zebraną mikroflorę przenosimy na odpowiednie, najczęściej zestalone pożywki.

Posiew ilościowy. Do oznaczenia ilości drobnoustrojów w produkcie spożywczym lub badanym materiale odważa się lub odmierza określoną ilość produktu (np. 1 lub 10 cm³, czy też 1 lub 10 g) i odpowiednio rozdrobniony wprowadza się do roztworu rozcieńczalnika (odpowiednio do 9 lub 90 cm ).