CCF20081011012 (2)

42 42

42 42

mikrobiologicznego produktu (jałowości, jakości

Ryc. 13. Wyżarzanie ezy w płomieniu palnika

Ryc. 14. Posiew (przesiew) ze skosu na skos

Ryc. 15. Prawidłowy sposób trzymania probówek i korków przy posiewie

-    stwierdzenie stanu mikroflory),

-    oznaczenie liczby drobnoustrojów w badanym materiale,

-    przygotowanie inokulatów do prowadzenia hodowli w warunkach doświadczalnych czy też do celów przemysłowych.

Wszystkie czynności związane z posiewem należy prowadzić z zachowaniem warunków jałowości. Prawidłowo przeprowadzony posiew wymaga nic tylko jałowości naczyń, sprzętu i pożywek, lecz także pomieszczeń. Najlepiej wykonywać posiew w pomieszczeniu przeznaczonym do tego celu, wyposażonym w szafę laminarną.

Posiew wykonuje się przy palniku gazowym, opalając wyloty naczyń i pipet w płomieniu, a także wyżarzając używane podczas posiewu ezy i igły (ryc. 12 i 13).

Posiewu drobnoustrojów dokonuje się ezą, igłą lub pipetą. Niekiedy posiew przeprowadza się przy użyciu jałowych tamponów z waty lub gazy albo szklanych pręcików wygiętych pod specjalnym kątem, tzw. glaszczck.

Za pomocą ezy wykonuje się posiewy na podłoża płynne i stale. Ezę z pobranym materiałem zanurza się w pożywce płynnej, wymywając komórki z jej powierzchni. Na pożywkach zestalonych natomiast, czy to w płytce Petricgo, czy też w postaci skosu w probówce, posiewu dokonuje się punktowo, dotykając ezą powierzchni pożywki albo pocierając powierzchnię zestalonego podłoża w sposób rysowy lub falisty (ryc. 14 i 15).

Dokonując posiewu igłą, wkłuwamy ją w słupek zestalonego podłoża (ryc. 16).

Do posiewu drobnoustrojów znajdujących się w środowisku płynnym służy pipeta. Za pomocą pipety zwykłej albo pasteurowskiej materiał można przenieść na pożywkę płynną lub zestaloną.

Posiew na podłoże zestalone można wykonać w dwojaki sposób:

Do wyjałowionej płytki Petricgo wprowadza się ściśle określony objętość zawiesiny mikroorganizmów (0,5 lub 1,0 cm ), a następnie zalewa upłynnionym i odpowiednio ochłodzonym (do około 50 C) podłożem stałym. Po czym zawartość płytki miesza się, delikatnie poruszając płytkę, ruchem kolistym po powierzchni stołu w celu równomiernego rozprowadzenia posianego materiału. Ten sposób dokonywania posiewu, określany jako metoda zalewowa, jest wykorzystywany w posiewach ilościowych oraz przy izolacji czystycli kultur.

Ryc. 16. Sposób posiewu na słupek

Drugi sposób polega na posiewie powierzchniowym zawiesiny drobnoustrojów na uprzednio zestalonej pożywce w płytce Pełnego. Zawiesinę rozprowadzamy po całej powierzchni podłoża za pomocą czy lub glaszczki (ryc. 17).

Używając jałowych tamponów dokonujemy wymazów z powierzchni. Zebraną mikroflorę przenosimy na odpowiednie, najczęściej zestalone pożywki.

Posiew ilościowy. Do oznaczenia ilości drobnoustrojów w produkcie spożywczym łub badanym materiale odważa się lub odmierza określoną ilość produktu (np. 1 lub 10 cm³, czy też I lub 10 g) i odpowiednio rozdrobniony wprowadza się do roztworu rozcieńczalnika (odpowiednio do 9 lub 90 cm ).