CCI20111108010 bmp

B.    Zakwasić próbkę w kuwecie 1-2 kroplami 0,1 molowego HC1, wymieszać przy pomocy pipety wprowadzającej kwas, i po 1 minucie ponownie zmierzyć wielkość absorpcji przy długości fal 665 i 750 nm wobec 90% acetonu jako odnośnika.

C.    Obliczyć zawartość chlorofilu a według wzoru a) oraz chlorofilu b według wzoru b).

W celu obliczenia wartości chlorofilu a i b należy odjąć wartość absorpcji przy długości fali 750 nm (przed zakwaszeniem) od wartości absorpcji 663 nm (przed zakwaszeniem) oraz wartość absorpcji dla 750 nm (przed zakwaszeniem) odjąć od wartości absorpcji 645 nm (przed zakwaszeniem) - poprawka na rozpraszanie światła na zawiesinie.

a) Chi a = 12,7 • Ać63 - 2,69 • A^s

b) Chi b = 22,9 • A₆₄₅ - 4,68 • A^

Wynik oznaczania zawartości chlorofilu a w glonach może być zwiększony przez obecność feopigmentów, które absorbują przy tej samej długości fali jak chlorofil a. Zakwaszony chlorofil a rozpada się do feofityny a (w wyniku wypadnięcia atomu Mg²⁺ z pierścienia porfirynowego), której maksima absorpcji leżą przy długości fali 410 nm i 665 nm (667 nm).

Kiedy roztwór czystego chlorofilu a przekształcamy do feofityny a w wyniku zakwaszenia, pik absorpcji zredukowany zostaje do 60% jego rzeczywistej wartości i ulega przesunięciu z 663 nm do 665 nm. Stosunek absorbcji przed zakwaszeniem (663 nm) do absorpcji po zakwaszeniu (665 nm) wynosi 1,7 dla 90% acetonu jako rozpuszczalnika. Roztwór czystej feofityny a nie wykazuje redukcji absorpcji przy długości fali 665 nm podczas zakwaszania, więc stosunek absorpcji przy długości 663 nm do absorpcji przy długości 665 nm jest równy 1,0. Zatem mieszanina chlorofilu a i feofityny a może mieć współczynnik absorpcji pomiędzy 1,0 a 1,7.

Zagadnienia do opracowania

1.    Definicja i rodzaje ekstrakcji.

2.    Czym się różni ekstrakcja jednostopniowa od wielostopniowej?

3.    Rodzaje ekstrakcji używanych do oznaczenia śladowych ilości metali toksycznych.

4.    Jak nazywają się naczynia do ekstrakcji?

5.    Przykłady organicznych rozpuszczalników używanych do ekstrakcji.

6.    Nazwij i wyjaśnij sposób ekstrakcji wykonanej na ćwiczeniach.

7.    Co to jest związek heterocykliczny?

8.    Budowa cząsteczki chlorofilu.

9.    Jakie są rodzaje chlorofilu?

10.    Czym różni się chlorofil a od chlorofilu b.

11.    Co to są wiązania sprzężone - wyjaśnij na podstawie budowy chlorofilu.

12.    Co to jest feofityna?

13.    Światło o jakiej barwie jest absorbowane przez chlorofil a?

14.    Dlaczego chlorofil a jest zielonym barwnikiem?