6771814997

Marcin Sieńczyk Załącznik 2

Rysunek 4: Niskocząsteczkowe sondy molekularne do detekcji neutrofilowych proteaz serynowych (A).

Detekcja katepsyny G w lizacie śledziony kota (B) oraz lizacie ludzkich komórek PBMC (C). Detekcja błonowej formy katepsyny G przy użyciu pochodnych 9 i 11 (górny panel światło widzialne, dolny panel po wzbudzeniu światłem UV). Jako kontrolę użyto DMSO zamiast sondy, a następnie inkubowano z fluorescencyjnie znakowaną streptawidyną (D).

układach biologicznych jak komórki PBMC czy śledziona. Co więcej, w porównaniu do klasycznych metod immunologicznych, zastosowanie niskocząsteczkowych sond molekularnych charakteryzuje się wysoką czułością detekcji proteolitycznie aktywnych form proteaz. Obecnie prace nad projektowaniem sond molekularnych specyficznych wobec neutrofilowych proteaz serynowych są kontynuowane we współpracy dr. hab. Adamem Lesnerem (Uniwersytet Gdański) oraz prof. Brice’a Korkmaz’a (Centre d’Etude des Pathologies Respiratoires, Tours, Francja).

Ludzka neutrofilowa elastaza

Drugą neutrofilową proteazą serynową, która stanowiła jeden z kluczowych aspektów mojej pracy naukowej w okresie ostatnich kilku lat, jest ludzka neutrofilowa elastaza (HNE). Podobnie jak katepsyna G i proteinaza 3 magazynowana jest z ziarnistościach azurofilnych i wydzielana po stymulacji komórki. Od momentu odkrycia elastazy trwają intensywne prace nad opracowaniem użytecznych klinicznie inhibitorów, które byłyby pomocne w terapii szeregu chorób układu oddechowego. Jednakże pomimo ogromnego wysiłku, żaden z testowanych inhibitorów nie przeszedł pomyślnie fazy badań klinicznych. Jedynym zatwierdzonym do użytku odwracalnym inhibitorem elastazy jest Siuelestat (Elaspol, ONO-5046; 12) opracowany przez japoński koncern Ono Pharma-ceutical Co., Ltd.

— 17 —