7862365976

EP 2 034 830 BI

bata. Każdy VH i VL składa się typowo z trzech CDR i czterech FR ułożonych od końca aminowego do końca karboksylowego w następującej kolejności: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4.

[0074]    "Domena immunoglobulinowa” odnosi się do domeny zmiennej lub stałej cząsteczek immunoglobuli-ny. Domeny immunoglobulinowe zazwyczaj zawierają dwie p-kartki utworzone z około siedmiu p-nici i zakonserwowanych wiązań disulfidowych (patrz np. A. F. Williams and A. N. Barclay (1988) Ann. Rev Immunol. 6:381-405). "Sekwencja domeny zmiennej immunoglobulinowej" odnosi się do sekwencji aminokwasowej, która może tworzyć strukturę wystarczającą do ustawienia sekwencji CDR w konformację odpowiednią do wiązania antygenu. Na przykład, sekwencja może obejmować wszystkie lub część sekwencji aminokwasowej naturalnie występującej domeny zmiennej. Na przykład, sekwencja może pominąć jeden, dwa lub więcej N- lub C-końcowych aminokwasów, wewnętrznych aminokwasów, może zawierać jedną lub więcej wstawek lub dodatkowe końcowe aminokwasy, lub może obejmować inne zmiany. W jednym wykonaniu, polipeptyd, który zawiera sekwencję zmiennej domeny immunoglobulinowej może łączyć się z inną sekwencją domeny zmiennej immunoglobuliny w celu utworzenia docelowej struktury wiążącej (lub "miejsca wiązania antygenu"), np. struktury, która oddziałuje z VLA-1.

[0075]    Łańcuch VH lub VL przeciwciała może ponadto zawierać wszystkie lub część regionu stałego łańcucha ciężkiego lub lekkiego tworząc w ten sposób, odpowiednio, immunoglobulinowy łańcuch lekki lub ciężki. W jednym wykonaniu przeciwciało jest tetramerem dwóch immunoglobulinowych łańcuchów ciężkich i dwóch immunoglobulinowych łańcuchów lekkich . Ciężkie i lekkie łańcuchy immunoglobulinowe mogą być połączone wiązaniami disulfidowymi. Region stały łańcucha ciężkiego obejmuje zazwyczaj trzy stałe domeny CH1, CH2 i CH3. Region stały łańcucha lekkiego obejmuje zwykle domenę CL. Region zmienny łańcuchów ciężkich i lekkich zawiera domenę wiążącą, która oddziałuje z antygenem. Regiony stałe tych przeciwciał zazwyczaj pośredniczą w wiązaniu przeciwciała z tkankami gospodarza lub czynnikami, w tym różnymi komórkami układu odpornościowego (np. komórkami efektorowymi) i pierwszym składnikiem (Clq) klasycznego układu dopełniacza.

[0076]    Jeden albo więcej regionów przeciwciała może być ludzkich, efektywnie ludzkich lub humanizowanych. Na przykład, jeden lub więcej regionów zmiennych może być ludzkich lub efektywnie ludzkich. Na przykład, jeden albo więcej CDR, np. CDR1 HC, CDR2 HC CDR3 HC CDR1 LC, CDR2 LC i CDR3 LC może być ludzkich. Każdy z CDR łańcucha lekkiego może być ludzki. CDR3 HC może być ludzki. Jeden lub więcej regionów zrębowych może być ludzkich, np. FR1, FR2, FR3 i FR4 z HC lub LC. W jednym wykonaniu wszystkie regiony zrębowe są ludzkie, np. pochodzące z ludzkich komórek somatycznych, np. komórki krwiotwórczej, która wytwarza immunoglobuliny lub z komórki niekrwiotwórczej. W jednym wykonaniu ludzkie sekwencje są sekwencjami linii zarodkowej, np. kodowanymi przez kwas nukleinowy linii zarodkowej. Jeden lub więcej regionów stałych może być ludzkich, efektywnie ludzkich lub humanizowanych. W innym wykonaniu co najmniej 70, 75, 80, 85, 90, 92, 95, lub 98% regionów zrębowych (np. FR1, FR2 i FR3 łącznie lub FR1, FR2, FR3 i FR4 łącznie) lub całe przeciwciało może być ludzkie, efektywnie ludzkie lub humanizowane. Na przykład, FR1, FR2 i FR3 łącznie mogą być co najmniej w 70, 75, 80, 85, 90, 92, 95, 98 lub 99% identyczne lub całkowicie identyczne z ludzką sekwencją kodowaną przez odcinek ludzkiej linii zarodkowej.

[0077]    "Efektywnie ludzki" immunoglobulinowy region zmienny jest immunoglobulinowym regionem zmiennym, który zawiera wystarczającą liczbę pozycji aminokwasów ludzkiego regionu zrębowego tak, że immunoglobulinowy region zmienny nie wywołuje odpowiedzi odpornościowej u zdrowego człowieka. Przeciwciałem "efektywnie ludzkim" jest przeciwciało, które zawiera wystarczającą liczbę ludzkich pozycji aminokwasów tak, że przeciwciało nie wywołuje odpowiedzi odpornościowej u zdrowego człowieka.

12