4053064474

Mikrobiologia - II rok Towaroznawstwo i Dietetyka

Metody filtracji

Polegają na przepuszczaniu określonej objętości powietrza przez odpowiedni jałowy filtr. Po przefiltrowaniu powietrza, wypłukuje się zatrzymane drobnoustroje ze stałego materiału filtracyjnego znaną objętością cieczy, która następnie posiewa się na pożywki stale.

II. ANALIZA ILOŚCIOWA MIKROORGANIZMÓW - METODY HODOWLANE

- znajomość ilości mikroorganizmów potrzebna jest dla oceny wzrostu drobnoustrojów w warunkach hodowli laboratoryjnych, dla oceny prawidłowego przebiegu procesów biotechnologicznych, dla określenia stopnia zanieczyszczenia produktów' żywnościowych lub farmaceutycznych

- metody określania ilości drobnoustrojów oparte są na metodach bezpośrednich - mikroskopowych, pośrednich - hodowlanych, wagowych, optycznych

- metody hodowlane pośrednie oparte są na zdolności drobnoustrojów do rozmnażania, dzięki czemu oznacza się tylko żywe komórki zdolne do wzrostu: w pożywkach płynnych (metoda rozcieńczeń) w pożywkach stałych (metoda płytkowa)

A) Metoda rozcieńczeń

- metoda seryjnych rozcieńczeń Listera należy do klasycznych technik stosowanych do określania liczby drobnoustrojów oraz do izolowania czystych hodowli ze środowiska płynnego

- zasada tej metody polega na wieloetapowym rozcieńczaniu badanej zawiesiny, tak aby w 1 cm³ znajdowała się jedna komórka

- z kolejnych rozcieńczeń wykonuje się posiewy po 1 cm³ do pożywek płynnych co najmniej w dwóch powtórzeniach

- po inkubacji określa się ilość prób dodatnich - takich w których rosną drobnoustroje

- korzystając z tablic McCrady’ego ujmujących statystycznie ilość prób ze wzrostem drobnoustrojów, rozcieńczeniem i ilością powtórzeń wylicza się w oparciu o rachunek prawdopodobieństwa NPL, czyli najbardziej prawdopodobną liczbę drobnoustrojów w 1 cm³ badanej próby

- dokładność metody zależy od przygotowania właściwych rozcieńczeń i od ilości równoległych prób

- warunkiem jest przygotowanie takiego szeregu rozcieńczeń, aby w ostatnim nie były już obecne mikroorganizmy

- jest to jednak metoda czasochłonna, pracochłonna, wymagająca dużej ilości szklą i jest rzadko stosowana

B) Metoda płytkowa